Maldi-Tof : nuovo golden standard nell’identificazione microbica

Nel panorama della diagnostica microbiologica, una tecnologia sta rapidamente emergendo come gold standard per l'identificazione rapida e precisa di batteri e funghi: la spettrometria di massa MALDI-TOF.

Questa tecnica – il cui acronimo sta per "Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization - Time of Flight"- rappresenta una svolta nella velocità e nell’accuratezza dell'identificazione microbica.

Come funziona questa tecnologia innovativa?

La tecnologia MALDI-TOF si avvale di uno spettrometro di massa composto da due componenti principali:

• la sorgente MALDI
• l'analizzatore TOF

Il processo inizia con un semplice passaggio: una piccola porzione di una colonia microbica, cresciuta su un terreno di coltura, viene prelevata e posizionata su una particolare piastrina. Qui, al campione viene aggiunto un composto chimico organico chiamato "matrice".

Successivamente, un laser pulsato irradia il mix di campione e matrice: l'energia del laser causa l'ablazione e il desorbimento del materiale, ionizzando le molecole dell'analita. Le molecole ionizzate, principalmente proteine, vengono poi accelerate in un tubo di volo in condizioni di vuoto.

È qui che entra in gioco la parte "Time of Flight”: le molecole ionizzate viaggiano attraverso il tubo a velocità diverse, a seconda della massa e della carica.

Molecole più leggere viaggiano più velocemente di quelle più pesanti.

Un rilevatore alla fine del tubo misura il tempo che ciascuna molecola impiega per attraversarlo, creando uno spettro unico per ogni microrganismo.

Questo spettro è essenzialmente un'"impronta digitale" proteica del microrganismo. Un software sofisticato confronta questo spettro con un vasto database di profili noti, identificando il microrganismo con un'accuratezza che può raggiungere il 99,9%.

I vantaggi di questa tecnologia sono molteplici. In primo luogo, la velocità: l'intero processo, dall'applicazione del campione all'identificazione, può essere completato in pochi minuti.

Questo è un miglioramento drastico rispetto ai metodi tradizionali, che possono richiedere ore o addirittura giorni.

In secondo luogo, l'accuratezza è notevolmente superiore. La capacità di creare un profilo proteico dettagliato permette di distinguere tra specie strettamente correlate che potrebbero essere difficili da differenziare con metodi biochimici tradizionali.

Inoltre, la spettrometria MALDI-TOF offre vantaggi in termini di costi operativi e facilità d'uso. Una volta installato il sistema, i costi per test sono relativamente bassi e la procedura è largamente automatizzata, riducendo il rischio di errori umani.